Kunskaperna kring standardisering av allergenextrakt är nyckelfaktorn till att ALK idag är världsledande inom produkter för diagnostik och allergen immunterapi.
Standardiserade produkter tas för givet av de flesta idag, men många kliniskt verksamma inom allergiområdet minns också hur det var att arbeta med äldre generationers extrakt. Då fick till exempel patientens dos reduceras vid byte till ny flaska för att man inte kunde vara säker på att sammansättningen var densamma som den tidigare givna.
ALK har varit pionjärer inom området och arbetar konstant med att utveckla och förfina produktionsprocesserna för att du och dina patienter ska vara säkra på att de får diagnostik och behandling med produkter som lever upp till de högsta kraven som ställs av läkemedelsmyndigheterna idag.
Den standardiseringsprocess som ALK arbetar utifrån kallas SQ-processen (Standardized Quality). I denna text ges en kort förklaring till den kliniska bakgrunden för allergensammansättningen i SQ-produkterna samt en beskrivning av hur standardiseringen möjliggör identisk reproduktion.
Syftet med SQ-processen är att säkerställa att produkten alltid har samma allergenkomposition, majorallergeninnehåll samt identisk biologisk aktivitet oavsett batch. Processen bygger på två huvudsakliga steg:
- Framtagande av standard (Inhouse reference)
Vilken sammansättning av allergen är optimal för att säkerställa klinisk nytta för så många patienter som möjligt. Varje nyproducerad batch jämförs sedan mot denna standard.
- Reproduktion av standard (Inhouse reference)
Säkerställa att varje batch som produceras är likvärdig med Inhouse reference.
Framtagande av standard
För att säkerställa en optimal allergensammansättning i extraktet har man utgått från den sammanlagda IgE-profilen från en population av patienter med kliniskt relevant allergi mot allergenet ifråga. Rent praktiskt tas blodprov från allergiska patienter på ALK i Hørsholm, varefter dessa samlas i en serumbank. Utifrån denna serumbank utarbetas ett allergogram där relevanta allergenen identifieras. På så sätt säkerställs att alla kliniskt relevanta allergener är med i extraktet. I figur 1 finns ett allergogram för katt. Utöver att identifiera vilka allergener det finns antikroppar mot, identifieras också allergenets förmåga att binda till IgE. Allergen med stark affinitet till IgE har en starkare förmåga att utlösa en allergisk reaktion hos en population. För den enskilde patienten kan dock vissa minorallergen sannolikt ha klinisk relevans. I allergogrammet (figur 1) syns att samtliga patienter i den testade populationen har IgE-antikropp mot kattens huvudallergen Fel d 1 samt att detta allergen även har en stark förmåga att binda IgE-antikroppar. Denna metod för att säkerställa en representativ standard utarbetas för samtliga SQ-produkter.
Reproduktion av standard
Kontroll av reproduktion av standarden kräver tre steg:
- Säkerställande av korrekt allergensammansättning.
- Kvantifiering av huvudallergen.
- Kvantifiering av den biologiska aktiviteten
Allergensammansättningen kontrolleras genom korsad immunelektrofores (CIE). Med denna metod ger varje allergen upphov till en synlig båge som kan jämföras mot standarden. Denna metod är semikvantitativ vilket gör att bågens storlek även ger ett mått på mängden allergen.
På detta vis finns kontroll över att samtliga major- och minorallergen är med i extraktet samt att mängden av dem är korrekt vid tillverkningen. Varje ny batch som produceras matchas mot standarden och ska vara likvärdig.
I figur 2 ses två olika batcher av husdammskvalster.
Figur 2.
För att kvantifiera huvudallergenen används olika mätmetoder – ELISA, SRID och RIE. Metoderna bygger på antikroppar med markörer som kan färgas in. Med ELISA och SRID utförs absorbansmätning medan RIE bygger på en gelelektroforesmetod. För varje allergenslag kvantifieras ett eller flera huvudallergen.
Figur 3.
I figur 3 visas en RIE (Rocket Immunelektrophoresis) där fyra olika batcher av katt jämförs mot en referens, samt en SRID som avläses av en dator.
För att slutligen mäta den biologiska aktiviteten används både in-vitro och in-vivo metoder. Blod från allergiska patienter binds in till extraktet för att se att inbindningen är identisk. Vid kontroll av standard, pricktestas minst 20 patienter för att se att extraktet motsvarar specifikationen såväl in-vivo som in-vitro.
Att producera en batch för SQ-standardiserat allergen kräver många olika kvalitetskontroller vid flera olika steg i processen. Det tar cirka fyra månader innan den sista kvalitetskontrollen är gjord och produkten kan sändas för paketering. Skulle batchen vid någon av kontrollerna avvika mot standarden kasseras den. Arbetet att förbättra processerna så att detta kan undvikas är hela tiden pågående, då en kasserad batch leder till ekonomiska och tidsmässiga förluster för alla parter.
Patientsäkerheten kommer givetvis alltid i första rummet. Du och din patient kan därför vara trygga med att de SQ-produkter ni använder för allergidiagnostik och behandling med allergen immunterapi lever upp till den högsta standarden inom området.
MAGNUS LINDQVIST
MEDICAL SCIENCE LIAISON, ALK NORDIC
Läsning för den intresserade:
Allergens and immunotherapy: Richard F. Lockey, CRC Press, 2014
Allergy Methods and Protocols: M. Jones, Humana Press, 2008